Chromatographie

Sur la photo, est un syst??me de chromatographie en phase gazeuse sophistiqu??. Cet instrument enregistre les concentrations de acrylonitrile dans l'air en diff??rents points tout au long du laboratoire de chimie.

Chromatographie [| krəʊmə | tɒgrəfi] (de grec χρῶμα chroma ??couleur?? et graphein γράφειν ????crire??) est le terme collectif pour un ensemble de techniques de laboratoire pour le la s??paration de m??langes. Le m??lange est dissous dans un liquide appel?? la phase mobile, ce qui le transporte ?? travers une structure de maintien d'un autre mat??riau appel?? la phase stationnaire. Les diff??rents constituants du m??lange de Voyage ?? des vitesses diff??rentes, ce qui les s??parent. La s??paration est bas??e sur le partitionnement diff??rentiel entre les phases mobile et stationnaire. Des diff??rences subtiles dans un compos?? de R??sultat de coefficient de partage de la r??tention diff??rentiel sur la phase stationnaire et en changeant ainsi la s??paration.

La Chromatographie peut ??tre pr??parative ou analytique. Le but de la chromatographie pr??parative est de s??parer les composants d'un m??lange pour une utilisation plus avanc??e (et est donc une forme de purification). Chromatographie analytique se fait normalement avec de plus petites quantit??s de mati??re et est destin?? ?? mesurer les proportions relatives d'analytes dans un m??lange. Les deux ne sont pas mutuellement exclusives.

Histoire

Chromatographie sur couche mince est utilis??e pour s??parer les composants d'un extrait de plante, illustrant l'exp??rience avec des pigments v??g??taux qui a donn?? son nom Chromatographie

Chromatographie, litt??ralement ????criture de couleur", a d'abord ??t?? employ?? par le scientifique russe Mikhail Tsvet en 1900. Il a continu?? ?? travailler avec la chromatographie dans la premi??re d??cennie du 20??me si??cle, principalement pour la s??paration des plantes pigments tels que chlorophylle, carot??nes, et xanthophylles. ??tant donn?? que ces composants ont des couleurs diff??rentes (vert, orange, et jaune, respectivement) ils ont donn?? la technique son nom. De nouveaux types de chromatographie d??velopp??s au cours des ann??es 1930 et 1940 ont fait la technique utile pour beaucoup les proc??d??s de s??paration.

technique de chromatographie d??velopp??e sensiblement ?? la suite des travaux de Archer John Porter Martin et Richard Laurence Millington Synge pendant les ann??es 1940 et 1950. Ils ont ??tabli les principes et techniques de base de chromatographie de partage, et leur travail ont encourag?? le d??veloppement rapide de plusieurs m??thodes chromatographiques: chromatographie sur papier, chromatographie en phase gazeuse, et ce qui allait devenir connu sous le nom haute performance de chromatographie en phase liquide. Depuis, la technologie a progress?? rapidement. Les chercheurs ont constat?? que les grands principes de la chromatographie de Tsvet pourraient ??tre appliqu??es dans de nombreuses fa??ons diff??rentes, r??sultant dans les diff??rentes vari??t??s de chromatographie d??crites ci-dessous. Les progr??s sont continuellement am??liorer la performance technique de chromatographie, permettant la s??paration de mol??cules de plus en plus similaires.

Conditions de chromatographie

• L'analyte est la substance ?? s??parer au cours de la Chromatographie.
• Chromatographie analytique est utilis??e pour d??terminer l'existence et ??ventuellement la concentration d'analyte (s) dans un ??chantillon.
• Une phase greff??e est une phase stationnaire qui est li?? par covalence ?? des particules de support ou ?? la paroi int??rieure du tube de colonne.
• Un chromatogramme est la sortie visuelle du chromatographe. Dans le cas d'une s??paration optimale, ou des motifs diff??rents pics sur le chromatogramme correspondent aux diff??rents composants du m??lange s??par??.

Repr??sent??e sur l'axe des x est le temps de r??tention et trac??e sur l'axe y d'un signal (par exemple obtenue par un spectrophotom??tre, un spectrom??tre de masse ou une vari??t?? d'autres d??tecteurs) correspondant ?? la r??ponse produite par les analytes de sortir du syst??me. Dans le cas d'un syst??me optimal du signal est proportionnelle ?? la concentration de l'analyte sp??cifique s??par??.

• Un chromatographe est un ??quipement qui permet une s??paration par exemple chromatographie en phase gazeuse sophistiqu??s ou s??paration chromatographique liquide.
• La chromatographie est un proc??d?? physique de s??paration qui distribue des composants ?? s??parer entre deux phases, l'une fixe (phase stationnaire), tandis que l'autre (la phase mobile) se d??place dans une direction d??finie.
• L'??luat est la phase mobile sortant de la colonne.
• L'??luant est le solvant qui transporte l'analyte.
• Une ??luotropique s??rie est une liste de solvants class??s en fonction de leur pouvoir ??lution.
• Une phase immobilis??e est une phase stationnaire qui est immobilis?? sur les particules de support, ou sur la paroi int??rieure du tube de colonne.
• La phase mobile est la phase qui se d??place dans une direction d??finie. Il peut ??tre un liquide (LC et ??lectrochromatographie capillaire (CEC)), un gaz (GC), ou un fluide supercritique (chromatographie supercritique fluide, SFC). La phase mobile est constitu??e de l'??chantillon ??tant s??par?? / analys?? et le solvant qui se d??place l'??chantillon ?? travers la colonne. Dans le cas de La phase mobile HPLC est constitu?? d'un solvant non polaire (s) tel que l'hexane en phase normale ou inverse dans des solvants polaires chromatographie en phase et ??tant s??par??e de l'??chantillon. La phase mobile se d??place ?? travers la colonne de chromatographie (phase stationnaire) dans laquelle l'??chantillon interagit avec la phase stationnaire et est s??par??e.
• Chromatographie pr??parative est utilis??e pour purifier des quantit??s suffisantes d'une substance pour une utilisation ult??rieure, au lieu de l'analyse.
• Le temps de r??tention est le temps caract??ristique n??cessaire pour un analyte particulier ?? passer ?? travers le syst??me (?? partir de l'entr??e de la colonne au d??tecteur) dans des conditions d??finies. Voir aussi: L'indice de r??tention de Kovats
• L'??chantillon est analys?? la question en chromatographie. Il peut ??tre constitu?? d'un seul composant ou il peut ??tre un m??lange de composants. Lorsque l'??chantillon est trait?? dans le cadre d'une analyse, la phase ou les phases contenant les analytes d'int??r??t est / sont consid??r??s comme l'??chantillon alors que tout par int??r??t s??par?? de l'??chantillon avant ou au cours de l'analyse est appel??e comme des d??chets.
• Le solut?? se r??f??re aux composants de l'??chantillon ?? la chromatographie de partage.
• Le solvant se r??f??re ?? toute substance capable de solubiliser une autre substance, et en particulier la phase mobile liquide en chromatographie liquide.
• La phase stationnaire est la substance fix??e ?? la place de la proc??dure de Chromatographie. Des exemples comprennent la silice en couche Chromatographie en couche mince

La chromatographie est bas??e sur le concept du coefficient de partage. Les partitions de solut??s entre deux solvants non miscibles. Lorsque nous faisons une immobile solvant (par adsorption sur une matrice de support solide) et un autre mobile, il en r??sulte dans les applications les plus courantes de Chromatographie. Si le support de matrice est polaire (par exemple du papier, de la silice, etc.), il est avant la chromatographie de phase, et si elle est polaire (C-18) non il est en phase inverse.

Techniques de forme de lit chromatographique

Une Chromatographie sur colonne

La Chromatographie sur colonne est une technique de s??paration dans laquelle le lit est stationnaire ?? l'int??rieur d'un tube. Les particules de la phase stationnaire solide ou le support rev??tu avec une phase stationnaire liquide peut remplir tout le volume int??rieur du tube (colonne garnie) ou ??tre port?? sur ou le long de la paroi du tube int??rieur en laissant un chemin libre ouverte de la phase mobile dans la partie m??diane du tube (colonne tubulaire ouverte). Les diff??rences de taux de mouvement ?? travers le milieu sont calcul??es ?? diff??rents temps de r??tention de l'??chantillon.

En 1978, WC Still a pr??sent?? une version modifi??e de la chromatographie colonne appel??e flash chromatographie sur colonne (flash). La technique est tr??s similaire ?? la Chromatographie sur colonne classique, ?? l'exception de ce que le solvant est entra??n?? ?? travers la colonne en appliquant une pression positive. Cela a permis ?? la plupart des s??parations ?? effectuer en moins de 20 minutes, avec des s??parations am??lior??e par rapport ?? l'ancienne m??thode. Les syst??mes de Chromatographie flash modernes sont vendus comme des cartouches pr??emball??es en plastique, et le solvant est pomp?? ?? travers la cartouche. Les syst??mes peuvent ??galement ??tre li??s avec des d??tecteurs et des collecteurs de fractions fournissant automatisation. L'introduction de pompes gradient conduit ?? des s??parations plus rapides et une utilisation moins de solvant.

En adsorption en lit expans??, d'un lit fluidis?? est utilis??, plut??t que d'une phase solide constitu??e par un lit tass??. Cela permet l'omission d'??tapes initiales de d??frichage telles que la centrifugation et la filtration, pour bouillons de culture ou des suspensions de cellules rompues.

La Chromatographie sur phosphocellulose utilise l'affinit?? de liaison de plusieurs prot??ines de liaison d'ADN de phosphocellulose. La plus forte de l'interaction de la prot??ine avec de l'ADN, plus la concentration en sel n??cessaire pour ??luer cette prot??ine.

Chromatographie Planar

Chromatographie planaire est une technique de s??paration dans lequel la phase stationnaire est pr??sent sous la forme ou dans un avion. L'avion peut ??tre un papier, servant en tant que telle ou impr??gn?? par une substance que le lit fixe ( Chromatographie sur papier) ou une couche de particules solides r??parties sur un support tel qu'une plaque de verre ( chromatographie sur couche mince). Diff??rents compos??s dans le m??lange de l'??chantillon se d??placent des distances diff??rentes selon la fa??on dont ils interagissent fortement avec la phase stationnaire par rapport ?? la phase mobile. Le sp??cifique facteur de r??tention _(Rf) de chaque produit chimique peut ??tre utilis?? pour aider ?? l'identification d'une substance inconnue.

La chromatographie sur papier

La chromatographie sur papier est une technique qui consiste ?? placer un petit point ou une ligne de solution de l'??chantillon sur une bande de papier de chromatographie. Le papier est plac?? dans un bocal contenant une couche peu profonde de solvant et scell??. Comme solvant se ??l??ve ?? travers le papier, il rencontre le m??lange de l'??chantillon, qui commence ?? se d??placer le papier avec le solvant. Ce papier est fait de cellulose, une substance polaire, et les compos??s entrant dans le m??lange de Voyage plus loin se ils sont non-polaire. Plus substances polaires lien avec le papier de cellulose plus rapidement, et donc de ne pas voyager aussi loin.

Chromatographie en couche mince

Chromatographie sur couche mince (CCM) est une technique largement utilis??e en laboratoire et est similaire ?? chromatographie sur papier. Cependant, au lieu d'utiliser une phase stationnaire de papier, il se agit d'une phase stationnaire d'une couche mince de adsorbant comme gel de silice, l'alumine , ou cellulose sur un plat, inerte substrat. Par rapport au papier, il a l'avantage de pistes plus rapides, de meilleures s??parations, et le choix entre les diff??rents adsorbants. Pour encore mieux r??solution et pour permettre une quantification, haute performance TLC peut ??tre utilis??.

Chromatographie D??placement

Le principe de base de Chromatographie d??placement est la suivante: Une mol??cule avec une affinit?? ??lev??e pour la matrice de chromatographie (le plongeur) participe efficacement ?? des sites de liaison, et ainsi de d??placer toutes les mol??cules ayant des affinit??s moindres. Il existe des diff??rences distinctes entre le d??placement et la Chromatographie d'??lution. En mode d'??lution, substances apparaissent g??n??ralement ?? partir d'une colonne, pics gaussiennes ??troites. S??paration large de pics, de pr??f??rence au niveau de r??f??rence, est souhait??e pour la purification maximale. La vitesse ?? laquelle l'un des composants d'un m??lange se d??place vers le bas de la colonne en mode d'??lution d??pend de nombreux facteurs. Mais pour deux substances de voyager ?? des vitesses diff??rentes, et de ce fait ??tre r??solus, il doit y avoir des diff??rences substantielles dans une certaine interaction entre les biomol??cules et la matrice de chromatographie. Les param??tres de fonctionnement sont ajust??es pour maximiser l'effet de cette diff??rence. Dans de nombreux cas, la s??paration des pics de r??f??rence peut ??tre obtenu seulement avec un gradient d'??lution de la colonne et des charges faibles. Ainsi, deux inconv??nients ?? la Chromatographie en mode d'??lution, en particulier ?? l'??chelle preparative, la complexit?? des op??rations sont, en raison de pompage gradient de solvant, et un faible d??bit, du fait de charges de colonne basse. Chromatographie de d??placement a des avantages sur chromatographie d'??lution dans que les composants sont r??solus en zones cons??cutives de substances pures plut??t que de ??pics??. ??tant donn?? que le proc??d?? tire profit de la non-lin??arit?? des isothermes, une plus grande colonne d'alimentation peut ??tre s??par??e sur une colonne donn??e aux composants purifi??s r??cup??r??s ?? des concentrations nettement plus ??lev??es.

Techniques de l'??tat physique de la phase mobile

Chromatographie en phase gazeuse

Chromatographie en phase gazeuse (GC), parfois aussi appel??e Chromatographie gaz-liquide (GLC), est une technique de s??paration dans lequel la phase mobile est un gaz. chromatographie en phase gazeuse est toujours effectu??e dans une colonne, qui est g??n??ralement ??emball???? ou ??capillaire?? (voir ci-dessous).

Chromatographie en phase gazeuse est bas??e sur un partition de l'analyte ??quilibre entre une phase stationnaire solide (souvent un mat??riau ?? base de silicone liquide) et un gaz portable (le plus souvent de l'h??lium). La phase stationnaire est coll??e ?? l'int??rieur d'un tube de verre de petit diam??tre (une colonne capillaire) ou une matrice solide ?? l'int??rieur d'un tube m??tallique plus grande (une colonne ?? garnissage). Il est largement utilis?? en chimie analytique ; bien que les temp??ratures ??lev??es utilis??es dans GC rendent impropre pour des biopolym??res ?? poids mol??culaire ??lev?? ou des prot??ines (les d??nature chaleur), fr??quemment rencontr??es dans la biochimie , il est bien adapt?? pour une utilisation dans le la p??trochimie, surveillance de l'environnement et assainissement, et domaines de produits chimiques industriels. Il est aussi largement utilis?? dans la recherche de la chimie.

Chromatographie liquide

Appareil de HPLC preparative

Chromatographie liquide (LC) est une technique de s??paration dans lequel la phase mobile est un liquide. Chromatographie en phase liquide peut ??tre effectu??e soit dans une colonne ou un avion. Chromatographie liquide ?? jour actuelle qui utilise en g??n??ral de tr??s petites particules d'emballage et une pression relativement ??lev??e est appel??e Chromatographie en phase liquide ?? haute performance (HPLC).

En HPLC de l'??chantillon est forc?? par un liquide sous haute pression (la phase mobile) ?? travers une colonne qui est garnie d'une phase stationnaire constitu??e de particules de forme irr??guli??re ou sph??rique, un couche monolithique poreux ou une membrane poreuse. HPLC est historiquement divis??e en deux sous-classes diff??rentes en fonction de la polarit?? des phases mobile et stationnaire. Modes dans lequel la phase stationnaire est plus polaire que la phase mobile (par exemple, le tolu??ne comme phase mobile, de la silice comme phase stationnaire) sont appel??s Chromatographie normale en phase liquide (NPLC) et le (par exemple, un m??lange eau-m??thanol oppos?? comme le mobile phase et C18 = octad??cylsilyl?? comme phase stationnaire) est appel?? invers??s chromatographie liquide en phase (RPLC). Ironiquement, la "phase normale" a moins d'applications et RPLC est donc utilis?? beaucoup plus.

Techniques sp??cifiques sous ce chapitre sont ??num??r??s ci-dessous.

La Chromatographie d'affinit??

La Chromatographie d'affinit?? est bas??e sur l'interaction non covalente s??lective entre un analyte et des mol??cules sp??cifiques. Il est tr??s sp??cifique, mais pas tr??s robuste. Elle est souvent utilis??e en biochimie dans la purification des prot??ines li??s ?? des mots cl??s. Ces des prot??ines de fusion sont marqu??es avec des compos??s tels que Ses balises, biotine ou des antig??nes, qui se lient ?? la phase stationnaire sp??cifique. Apr??s purification, certaines de ces balises sont habituellement retir??s et la prot??ine pur est obtenu.

La Chromatographie d'affinit?? utilise souvent l'affinit?? pour une biomol??cule un m??tal (Zn, Cu, Fe, etc.). Les colonnes sont souvent pr??par??s manuellement. Colonnes d'affinit?? traditionnels sont utilis??s comme une ??tape pr??paratoire ?? d??busquer biomol??cules ind??sirables.

Cependant, les techniques HPLC existent qui ne utilisent propri??t??s d'affinit?? chromatogaphy. M??tal chromatographie d'affinit?? immobilis??e (IMAC) est utile pour s??parer les mol??cules susmentionn??es bas??e sur l'affinit?? relative pour le m??tal (Ie Dionex IMAC). Souvent, ces colonnes peuvent ??tre charg??s avec des m??taux diff??rents pour cr??er une colonne d'affinit?? avec une cible.

Chromatographie fluide supercritique

Chromatographie fluide supercritique est une technique de s??paration dans lequel la phase mobile est un fluide au-dessus et relativement proche de sa temp??rature critique et la pression.

Techniques de m??canisme de s??paration

Chromatographie d'??change d'ions

Chromatographie d'??change d'ions (g??n??ralement d??nomm?? chromatographie ionique) utilise un m??canisme d'??change d'ions pour s??parer les analytes en fonction de leurs charges respectives. Elle est g??n??ralement r??alis??e dans des colonnes mais peut aussi ??tre utile en mode planaire. Chromatographie d'??change d'ions utilise une phase stationnaire charg??e de s??parer des compos??s charg??s, y compris des anions , des cations , des acides amin??s , peptides et prot??ines . Dans les proc??d??s classiques de la phase stationnaire est un r??sine ??changeuse d'ions qui transporte charg?? des groupes fonctionnels qui interagissent avec les groupes de charge oppos??e du compos?? ?? conserver. Chromatographie d'??change d'ions est couramment utilis?? pour purifier des prot??ines ?? l'aide FPLC.

Chromatographie par exclusion de taille

Chromatographie d'exclusion st??rique (SEC) est ??galement connu comme la Chromatographie par permeation de gel (GPC) ou par Chromatographie de filtration sur gel et s??pare les mol??cules selon leur taille (ou plus exactement en fonction de leur diam??tre hydrodynamique ou le volume hydrodynamique). Les petites mol??cules sont capables de p??n??trer dans les pores des m??dias et, par cons??quent, les mol??cules sont pi??g??s et retir??s de la circulation de la phase mobile. Le temps de s??jour moyen dans les pores d??pend de la taille efficace des mol??cules d'analyte. Cependant, les mol??cules de taille sup??rieure ?? la taille moyenne des pores du garnissage sont exclus et donc souffrent essentiellement pas de r??tention; ces esp??ces sont les premiers ?? ??tre ??lu??. Il se agit g??n??ralement d'une technique chromatographique ?? basse r??solution et par cons??quent il est souvent r??serv??e ?? la derni??re ??tape, "polissage" d'une purification. Il est ??galement utile pour la d??termination du structure tertiaire et structure quaternaire des prot??ines purifi??es, d'autant plus qu'il peut ??tre r??alis?? sous natifs solution conditions.

Adsorption ??largi de lit (EBA) S??paration chromatographique

Expanded Bed Adsorption (TSA) S??paration chromatographique capture d'une prot??ine cible ?? partir d'un courant d'alimentation brut quand il passe ?? travers un syst??me de colonne de chromatographie contenant des billes d'adsorbant. Avec cette technique, la charge brute peut ??tre trait??e directement dans la colonne chromatographique, en ??vitant les ??tapes traditionnelles de clarification et de pr??-traitement. EBA S??paration chromatographique est hautement ??volutive, de diam??tre de 1 cm colonnes ?? base de laboratoire ?? de grandes colonnes de production jusqu'?? 2 m??tres de diam??tre. Ces colonnes peuvent g??n??ralement g??rer stock d'alimentation d??bit de plus de 1.000.000 litres par jour d'une capacit?? de 1 000 prot??ines de tonnes par ann??e de production.

Techniques sp??ciales

Chromatographie en phase inverse

Chromatographie en phase inverse est un proc??d?? d'??lution utilis?? dans la Chromatographie liquide dans lequel la phase mobile est sensiblement plus polaire que la phase stationnaire.

Chromatographie bidimensionnelle

Dans certains cas, la composition chimique dans une colonne donn??e peut ??tre insuffisante pour s??parer certains analytes. Il est possible de diriger une s??rie de pics non r??solus sur une deuxi??me colonne avec diff??rentes propri??t??s physico-chimiques ( classification chimique) des propri??t??s. ??tant donn?? que le m??canisme de maintien sur ce nouveau support solide est diff??rente de la premi??re s??paration dimensionnelle, il peut ??tre possible de s??parer des compos??s qui sont indiscernables par chromatographie unidimensionnelle. L'??chantillon est rep??r?? dans un coin d'une plaque carr??e, d??velopp??, s??ch?? ?? l'air, puis tourn?? de 90 ?? et g??n??ralement am??nag?? dans un deuxi??me syst??me de solvant.

Chromatographie ?? lit mobile simul??

Chromatographie en phase gazeuse pyrolyse

La pyrolyse chromatographie en phase gazeuse par spectrom??trie de masse est une m??thode d'analyse chimique dans lequel l'??chantillon est chauff?? jusqu'?? d??composition pour produire des mol??cules plus petites qui sont s??par??s par chromatographie en phase gazeuse et par spectrom??trie de masse d??tect??es.

La pyrolyse est la d??composition thermique des mat??riaux dans une atmosph??re inerte ou sous vide. L'??chantillon est mis en contact direct avec un fil de platine, ou plac?? dans un tube d'??chantillon de quartz et chauff?? rapidement ?? 600-1000 ?? C. Selon l'application, des temp??ratures encore plus ??lev??es sont utilis??es. Trois techniques de chauffage diff??rents sont utilis??s dans pyrolyzers r??els: four isotherme, chauffage par induction (Point de Curie filament), et chauffage utilisant des filaments de platine r??sistifs. Les grosses mol??cules clivent ?? leurs points faibles et produisent des fragments plus petits, les plus volatiles. Ces fragments peuvent ??tre s??par??s par chromatographie en phase gazeuse. Chromatogrammes GC pyrolyse sont g??n??ralement complexes car un large ??ventail de produits de d??composition est form??. Les donn??es peuvent ??tre utilis??es soit comme empreinte digitale pour ??tablir l'identit?? de la mati??re ou des donn??es GC / MS est utilis??e pour identifier des fragments individuels afin d'obtenir des informations structurales. Pour augmenter la volatilit?? des fragments polaires, divers r??actifs de m??thylation peuvent ??tre ajout??s ?? un ??chantillon avant pyrolyse.

Outre l'utilisation de pyrolyzers d??di??s, pyrolyse GC d'??chantillons solides et liquides peut ??tre effectu??e directement ?? l'int??rieur temp??rature programmable Vaporisateur (PTV) injecteurs qui fournissent chauffage rapide (jusqu'?? 30 ?? C / s) et des temp??ratures maximales ??lev??es de 600-650 ?? C. Cela est suffisant pour certaines applications de pyrolyse. Le principal avantage est qu'aucun instrument d??di?? doit ??tre achet?? et la pyrolyse peut ??tre effectu??e dans le cadre de l'analyse de GC routine. Dans ce GC quartz cas doublures d'entr??e doivent ??tre utilis??es. Les donn??es quantitatives peuvent ??tre acquises, et de bons r??sultats de d??rivation int??rieur de l'injecteur PTV sont publi??es ainsi.

Chromatographie liquide de prot??ine rapide

Chromatographie liquide rapide des prot??ines (FPLC) est un terme appliqu?? ?? plusieurs techniques de chromatographie qui sont utilis??s pour purifier des prot??ines. Beaucoup de ces techniques sont identiques ?? celles men??es sous la chromatographie liquide ?? haute performance, cependant utiliser des techniques FPLC sont g??n??ralement pour pr??parer de grands lots ?? l'??chelle d'un produit purifi??.

Chromatographie contrecourant

Un exemple d'un syst??me de HPCCC

Chromatographie ?? contre-courant (CCC) est un type de Chromatographie en phase liquide-liquide, o?? les deux phases stationnaire et mobile sont des liquides. Le principe de fonctionnement de l'??quipement de CCC n??cessite une colonne constitu??e d'un tube ouvert enroul?? autour d'une bobine. La bobine est entra??n??e en rotation dans un mouvement giratoire ?? double axe (a cardio??de), ce qui provoque un champ gravit?? variable (G) ?? agir sur la colonne au cours de chaque rotation. Ce mouvement provoque la colonne de voir une ??tape de s??paration par tour et composants de l'??chantillon s??par?? dans la colonne en raison de leur coefficient de partage entre les deux phases liquides non miscibles utilis??s. Il existe de nombreux types de CCC disponibles aujourd'hui. Il se agit notamment HSCCC (CCC haute vitesse) et HPCCC (CCC haute performance). HPCCC est la version la plus r??cente et la plus performante de l'instrumentation disponible pour le moment.

Chromatographie chirale

Chromatographie chirale implique la s??paration de st??r??oisom??res. Dans le cas des ??nantiom??res, ceux-ci ne ont pas de diff??rences chimiques ou physiques en plus d'??tre des images en miroir en trois dimensions. Chromatographie classique ou d'autres proc??d??s de s??paration sont incapables de les s??parer. Pour activer s??parations chirales avoir lieu, soit la phase mobile ou la phase stationnaire doivent ??tre elles-m??mes chiral, donnant diff??rentes affinit??s entre les analytes. Des colonnes chirales de CLHP Chromatographie (avec une phase stationnaire chirale) en phase normale et inverse les deux sont disponibles dans le commerce.